Diabetologia：激活但功能受损的记忆Tregs在1型糖尿病患者进展缓慢的过程中会逐渐扩展

从第一次显现出来肝细胞自身病原体到显现出来1改进型哮喘诊疗症状的成效叛将在老年人末期就有很好的描述，多个肝细胞自身病原体乙型肝炎的老年人以后有70%在血清转换后10年内患病哮喘，而随访15年的老年人这一数目减少到84%。相对于之下，占有诊疗1改进型哮喘一半以上的改进型1改进型哮喘的得病机制还不会得到充分的研究者。

越来越多的人开始不应用于分期系统来定义1改进型哮喘的成效：幼体在显现出来多种肝细胞自身病原体时离开第1过渡阶段，显现出来血糖异常时离开第2过渡阶段，显现出来症状时离开第3过渡阶段。一些多发肝细胞自身病原体乙型肝炎的幼体，在1期和2期，成效较极快，并发展为得病的1改进型哮喘。我们以后描述了一两组在首次监测到多种肝细胞自身病原体样本后至少10年无哮喘的极极快成效者，这两组病症人数少，但构造比较明确。随后，我们发现肝细胞自身抗体特异性CD8+T细胞内反不应在成效缓极快的病症以后基本不依赖于，但在近期得病和则有的哮喘病症以后很容易监测到。这似乎声称，与成效病症相对于，这些病症自身病原体的调节强化。

更早研究者声称，尽管调节性T细胞内(Treg)数量较长时间，但哮喘病症依赖于一些系统毛病，其以后以外对IL-2的反不应能力降低。此外，哮喘病症以后的波动CD4+T细胞内似乎对调节更具抵抗性，展示出为波动T细胞内的可抑制减弱，自然归因于的Treg和体外归因于的游离Treg，以及抗体个人经历的CD4+T细胞内以后IL-2反不应减弱。本研究者的目的是描述了CD4+调节性T细胞内(Treg)在这群人极缓极快成效者以后的构造，他们的平均岁数为43岁(31-72岁)，随访等待时间为18-32年。

原理：BOX研究者是一项以青年人为基础的中轴研究者，在21岁以下胃癌的病症亲属以后检验1改进型哮喘的危险因素所。我们以后描述了长期缓极快成效者的构造，他们保有多重肝细胞自身病原体乙型肝炎至少10年，但不会显现出来哮喘的诊疗症状，极快性或非来进行性自身免疫。随后，10名继续保有无哮喘并愿意提供大量血液样本的缓极快成效者确立T和B细胞内系统量化。在目前的研究者以后，8名极快成效者(SP两组)，以后位岁数43岁(31-72岁)，18 - 32岁彼此之间的肝细胞自身病原体乙型肝炎。所有的大多数人都位处1改进型哮喘成效的1期，尽管一些人随后失去了肝细胞自身病原体对某些抗体的乙型肝炎反不应，然而，一名病症仍未位处2期至少6年，但不会显现出来诊疗症状，一名病症被诊断为哮喘，该患者72岁，在采集实验样本时，其HbA1c下降时到53 mmol/mol(7%)，在数据量化以后对该遗传物质来进行了除此以外审核。分离外周血单个核细胞内(PBMCs)，采用多参数流式细胞内练成和T细胞内可抑制实验审核遗传物质以后Treg的频叛将、表改进型和系统。不应用于FlowSOM和CITRUS(聚类认定、表征和回归)来进行无监督聚类量化，审核Treg表改进型。

结果：与肥胖症遗传物质相对于，来自极快成效体的潜意识CD4+T细胞内的监督聚类说明了，抑制的潜意识CD4+ Treg频叛将减少，与抗生素游离的TNFR相关细胞(GITR)强调减少有关。一名HbA1c下降时的病症与成效缓极快者和匹配的对照两组相对于，Treg小曲有所区别。系统量化声称，与肥胖症遗传物质相对于，来自缓极快成效体的Treg内源性的CD4+波动T细胞内可抑制轻微损伤。展示出为对波动CD4+T细胞内CD25和CD134强调的可抑制减少。

由此可知1 深入的表改进型量化说明了，CD4+Treg亚改进型在极快成效队列以后减少。由FlowSOM降解的Treg二楼，周围在来自所有遗传物质的活CD4+CD45RA -细胞内上。根据标示物强调认定出10个元簇:潜意识T细胞内_1;潜意识T cell_2;潜意识T cell_3;潜意识T cell_4;CD49b潜意识T细胞内;HLA-DR + GITR +潜意识T细胞内;存储器Treg_1;存储器Treg_2;存储器Treg_3;和存储器Treg_4。(a)不应用于9个不同Treg标示降解的10个元簇的MST。每个节点代表一个坦克部队(100个坦克部队)，更大的元坦克部队(10个元坦克部队)在节点两组四周上色。每个节点以后的饼由此可知透露单个标示的强调级别。(b)每个元聚类的热由此可知，以说明了整体标示强调。(c, d)为HD两组(c)和SP两组(d)降解由此可知，以及FlowSOM识别的每个元簇的孔洞。(e-l)相对丰度为每个metacluster罐示意由此可知(丰度> 0.05%)确定为HD和SP两组:存储器Treg_2 (e),存储器Treg_3 (f),存储器Treg_4 (g), HLA-DR + GITR +潜意识T细胞内(h)、潜意识T cell_1(i),潜意识T cell_2 (j),潜意识T cell_3 (k) n d CD49b潜意识T细胞内(l)。橙色带子代表**SP 606。**p< 0.01, Wilcoxon配对符号秩核查。此键适用于由此可知形部分(a)， (c)， (d)和d (e-l)

由此可知2 不应用于CITRUS的预测模改进型证明，Treg频叛将的减少是成效缓极快的logo。AO离子通道(a - f)和柑橘量化(g-k)比较SP大多数人和匹配的HD大多数人在CD4+CD45RA−T细胞内上的差别。(a)亲本CD25+ cd127 lotreg和CD25loCD127+T c e l群体的代表性由此可知。CD25+ cd127lotreg被CD39和FOXP3掺入，然后通过HLA-DR和GITR强调来进行分离，各种类型FlowSOM群体。(b) HD(黑点)和SP(蓝点)两组以及遗传物质SP 606(橙色)以后CD25+ cd127的频叛将概要由此可知。(c-f) CD25+CD127loCD39+FOXP3+和CD25loCD127+离子通道邻域的罐示意由此可知;(c) HLA-DRloGITR−(存储器Treg_2)， (d) HLA-DRintGITRlo(存储器Treg_3)， (e) HLA- d RhiGITR+(存储器Treg_4)， (f) HLA- d RhiGITR+(HLA-DR+GITR+存储器T cell)。(g - i)柑桔簇螺旋由(g) CD127， (h) CD25和(i) FOXP3强调其中心着色，箭头突出的簇被识别为SP和HD队列彼此之间的不同。(j)罐示意由此可知说明了了在SP(蓝点)和HD(灰点)两组以后，CITRUS潜意识Treg_3和Treg_4的相对丰度(数目)。(k)直方由此可知说明了每个簇的表改进型(粉红色)和Treg标示相对强调与背景强调(蓝色);上列，存储器Treg_3;下面一行，存储器Treg_4。背景与所有其他簇以后标示的强调有关。*p< 0.05， **p< 0.01, Wilcoxon配对符号秩核查

由此可知3 与肥胖症献血者相对于，成效缓极快者潜意识treg的GITR减少。每个潜意识CD4+T细胞内元簇(潜意识T细胞内_1;潜意识T cell_2;潜意识T cell_3;CD49b +潜意识T细胞内;HLA-DR + GITR +潜意识T细胞内;存储器Treg_2;存储器Treg_3;来自FlowSOM的memory Treg_4)监测每个强调标示的变化。(a,b)来自HD (a)和S (b)队列的强调热由此可知(sp606不以外在内)。(c,d)潜意识Treg_4元簇以后所有HD(灰色)、所有SP(蓝色)和SP 606(橙色)的FlowSOM GITR强调联接，说明了直方由此可知(c)和概要由此可知(d)。Wilcoxon配对符号秩和核查，p< 0.07(橙色)所有遗传物质以外，p< 0.05(蓝色)遗传物质SP 606和匹配的HD不以外在测试以后。(e,f) HLA-DRhiGITR+Tregs以后GITR强调，从AO离子通道，从所有HD(灰色)、所有SP(蓝色)和SP 606(橙色)联接，说明了直方由此可知(e)和概要由此可知(f) *p< 0.05, Wilcoxon配对符号秩核查

由此可知4 来自缓极快成效的CD4+ treg细胞内控制波动CD4+T细胞内的能力降低。SP两组用蓝色的中央线和带子透露，HD两组用黑色的中央线和带子透露，橙色的中央线/带子透露遗传物质sp606。不应用于CD4+CD25+ Treg分选试剂盒对CD4+T细胞内来进行分选。CD4+CD25−(需要的话者)被标示为CFSE, Treg按观察的数目滴定。用抗CD3 /28微珠活化细胞内，人才3同一天来进行流式细胞内练成监测。(a-d)与CD4+需要的话者相对不应的treg人才(自体)(e-h) HD、SP或SP 606 Treg与HD需要的话者人才。(a,b,f) CFSE细胞分裂(a,e)和CFSE可抑制%-(b,f)。(c, d,h) CD25 (c,g)和CD134 (d,h)的可抑制%-。不应用于乙型肝炎对照(抑制的响不应细胞内不含treg)计算可抑制%-。*p< 0.05， **p< 0.01， ***p< 0.001，重复测量双向方差量化。†p < 0.0 5 Bonferroni的事后多重比较测试

由此可知5 波动CD4+T细胞内对缓极快成效的T细胞内活化的可抑制更敏感。SP两组用蓝色的中央线和带子透露，HD两组用黑色的中央线和带子透露，橙色的中央线/带子透露遗传物质sp606。不应用于CD4+CD25+Treg分选试剂盒对CD4+T细胞内来进行分选。CD4+CD25−(需要的话者)被cfsel标示，treg按观察的数目滴定。用抗CD3 /28微珠活化细胞内，人才3同一天来进行流式细胞内练成(CD25反染)和细胞内因子量化。HD Treg与HD、SP或sp606需要的话者共同完成人才。(a,b) CFSE细胞分裂(a)和CFSE可抑制百分叛将(b)。(c,d) CD25可抑制百分叛将(c)和CD134可抑制百分叛将(d)。(e,f) IFN-γ(e)和IL-17A (f)在共人才以后的强调。***p< 0.001， **p< 0.01，重复测量双向方差量化。†p < 0.0 5 Bonferroni的事后多重比较测试

得出结论：我们得出的得出结论是，来自缓极快成效子的活化潜意识CD4+Treg在GITR强调以后得到了扩展和多样化，强调了进一步研究者Treg在1改进型哮喘后果幼体以后的一般而言的合理性。

原文出处：

Boldison J, Long AE, Aitken RJ,et al.Activated but functionally impaired memory Tregs are expanded in slow progressors to type 1 diabetes.Diabetologia 2021 Oct 28